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天狼猩紅染色

簡要描述:天狼猩紅染色:偏振光鏡檢查,膠原纖維有正的單軸雙折射光的屬性,與天狼星紅復(fù)合染色液結(jié)合后,可增強雙折射,提高分辨率,從而區(qū)分兩型膠原纖維。

  • 更新時間:2024-09-13
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詳細介紹

基本原理和用途

天狼猩紅染色是一種用于組織學(xué)的染色技術(shù),它利用強酸性染料天狼猩紅與膠原纖維中的堿性基團反應(yīng),使膠原纖維特異性地著染為猩紅色。這種染色方法

主要用于區(qū)分不同類型的膠原纖維,如I型和II型膠原纖維,在偏振光顯微鏡下可以進一步區(qū)分這些膠原纖維的類型。

此染色在研究各種組織病變時對膠原纖維異?;蚶w維增生的組織中具有重要的應(yīng)用價值。


實驗步驟和染色結(jié)果的解讀

  1. 脫蠟至水:將石蠟切片依次放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、二甲苯Ⅲ中各5分鐘,以去除切片上的石蠟。接著,將切片依次放入無水乙醇、95%乙醇、75%乙醇中各1分鐘,最后用蒸餾水洗5分鐘。這一步驟的目的是使切片逐漸從有機溶劑過渡到水溶性環(huán)境,為后續(xù)染色做好準(zhǔn)備。

    2. 鐵蘇木素染色:在切片上滴加鐵蘇木素染液,染色時間為5-10分鐘,以染出細胞核。然后用蒸餾水洗去多余的染色液,時間約為10-20秒。隨后,

                                   用自來水洗5分鐘,以進一步清除殘留的染色液。

    3. 染色:在切片上滴加天狼猩紅染液,染色時間為15-30分鐘,以染出膠原纖維。然后,用流水稍沖洗,去除切片表面的染液。

    4. 脫水透明:將切片依次放入75%乙醇、95%乙醇、無水乙醇中各1分鐘,進行脫水處理。再將切片放入二甲苯中3次,每次1-2分鐘,以達到透明效果。

    5. 封片觀察:使用中性樹膠對切片進行封固。然后,在光學(xué)顯微鏡下觀察染色結(jié)果,膠原纖維呈紅色,細胞核呈棕褐色到黑色,肌纖維呈黃色。如有必要,可在                             偏振光鏡下觀察,以區(qū)分不同類型的膠原纖維。


注意事項和實驗技巧

在進行天狼猩紅染色時,需要注意kuweisuan天狼猩紅染液的使用,因為kuweisuan具有一定的毒性,操作時應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆雷o措施。此外,由于染色

可能容易掉色,應(yīng)及時封片以保持染色效果。在染色過程中,染色時間可能需要根據(jù)實驗結(jié)果進行調(diào)整,以獲得最佳的染色效果。




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