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小動物脂肪染色

簡要描述:小動物脂肪染色:油紅O為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色,油紅O脂肪染色法指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進行染色的方法。

  • 更新時間:2022-12-23
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詳細介紹

油紅O染色是鑒定間充質(zhì)干細胞向成脂細胞分化的一個重要指標(biāo)。用特定的成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基(貨號:CTCC-JD003)培養(yǎng)一段時間后 ,間充質(zhì)干細胞可分化為成脂細胞,并在細胞中形成脂滴。油紅O屬于偶氮染料,是很強的脂溶劑和染脂劑,與甘油三酯結(jié)合呈小脂滴狀。脂溶性染料能溶于細胞中的脂滴。當(dāng)染料加入細胞中,染料則離開染液而溶于細胞內(nèi)的脂滴中,使細胞內(nèi)的脂滴星紅色或橘紅色。

油紅O工作液制備:

油紅染色液與染色稀釋液按照3:2的比例進行稀釋,混勻后室溫靜置10min,濾紙過濾;

移除孔內(nèi)培養(yǎng)基,每孔加入2ml洗滌液1號靜置1min后移除,洗滌2次;

每孔加入2ml固定液,37°C (或室溫)固定30min ;

移除固定液。每孔加2ml洗滌液1號沖洗,洗滌2次;

每孔加入油紅O工作液2ml,37°C (或室溫)染色10-20min ;

每孔加入洗澡液3號2ml,快速移除,根據(jù)染色背景情況可重復(fù)1-2次;

每孔加洗滌液2號2ml,洗2次后顯微鏡下觀察。

實驗結(jié)果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,細胞核呈深藍色。

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